Como a criopreservação aumenta as chances de fertilização?
Com a fertilização natural, o segredo das glândulas sexuais masculinas é misturado em parte com as células da epiderme, como resultado, ocorre uma certa mudança no pH do meio, o que leva à destruição da cobertura de lipoproteína dos espermatozóides, i.e. a sua ativação. Estando nessa condição, o tempo de vida das células reprodutivas é severamente limitado, o que exclui seu uso posterior de fertilização in vitro. É por isso que o método de criopreservação é usado .
Esta técnica aumenta significativamente a vida útil dos espermatozóides e permite:
- reduzir a atividade motora dos espermatozóides;
- fornece-lhes uma fonte adicional de energia;
- protege as membranas das células germinativas da destruição;
- previne o acúmulo de produtos metabólicos tóxicos;
- bloqueia a reprodução de microorganismos no ejaculado.
Quais médiuns são usados para armazenar o sêmen?
Para facilitar, o chamado processo de esmagamento do ejaculado, necessário para o isolamento das células germinativas, pré-dilui o espermatozóide. Reagentes especiais são usados.
Até o momento, é costume usar mídia sintética para armazenamento de sêmen, cada qual requer condições especiais. Normalmente, esse tipo de ambiente consiste em vários componentes, geralmente pelo menos três. Deste modo, na sua estrutura é possível alocar o açúcar, muitas vezes e usam-se glicose e lactose, citrato de sódio.
Se falamos de compostos químicos específicos que podem ser usados como meios de armazenamento de espermatozóides, então entre estes pode ser chamado de tampão Tris, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
Em que condições o ejaculado é armazenado?
A tecnologia de congelamento e armazenamento de esperma requer aderência a um regime especial de resfriamento, bem como o uso de dispositivos especiais. Neste caso, a própria sala do laboratório deve necessariamente estar equipada com dispositivos que esterilizem o ar.
Antes que o ejaculado seja coletado, todos os dispositivos necessários para a criopreservação, em particular todos os tipos de frascos, cilindros graduados, pipetas, filtros de papel são esterilizados em um gabinete especial, a uma temperatura de 130-150 graus. Antes do procedimento de amostragem direta, eles são colocados em um termostato especial, que mantém uma temperatura constante de 37 graus.
Uma vez que a amostra de esperma masculino é retirada, ela é colocada em um frasco estéril. A temperatura de armazenamento do esperma deve ser constante. O processo de resfriamento é realizado em 2 etapas.
Para usar o ejaculado, criopreservado mais cedo, o recipiente junto com ele é colocado em água morna, onde ocorre o descongelamento lento. Depois disso, os crioprotetores usados são removidos, por repetida reprecipitação de espermatozóides na centrífuga. Depois disso, o próprio fluido seminal é substituído por um meio nutriente no qual os espermatozóides são colocados posteriormente.